ホット スタートTaq/DNAのポリメラーゼを選ぶ方法

ホット スタートのTaqの酵素は広く利用されている。通常のDNAポリメラーゼと比較されて、ホット スタートのTaqの酵素は効果的にプライマー二量体の無指定の拡大そして形成を避け効果的にターゲット遺伝子の拡大の成功率を改善できる。特に遺伝子検査の分野で、ホット スタートのTaqの酵素は企業の必須の標準として識別され、通常のDNAポリメラーゼは使用されるべきではない。広く利用されている同様に上のホット スタートのTaqの酵素から見ることができる。現在、国内市場のホット スタートのTaqの酵素の多くのブランドがあるが、良質のホット スタートのTaqの多くの酵素がない。そう多くのホット スタートのTaqの酵素プロダクトに直面されて、私達はいかに選ぶべきであるか。

1. 高い拡大の効率のホット スタートのTaqの酵素を選びなさい

PCRの拡大の効率はTaqの酵素の性能と密接に関連している。よいTaqの酵素反応の後でシステムは最大限に活用される、拡大の効率は95%の上にあり、最初の型板量の拡大の範囲は広い。満足な拡大は型板量が高い、指数拡大の期間は長いときターゲット遺伝子の内容が低い、毒されることは容易ではないとき得ることができ。劣った実行のTaqの酵素のために、反作用システムが何回もの間最大限に活用されても、拡大の効率はまだ90%よりより少しである、拡大のカーブの「S」の形は明らかではない、斜面は小さく、カーブは平らである。型板の量は低いとき、増幅することができないし型板の量が高いとき、拡大の効果は理想的ではない。従って、高い拡大の効率のDNAポリメラーゼの選択はPCRおよびqPCRの成功に重大である。

2. 強い酵素力のホット スタートのTaqの選り抜き酵素

Taqの酵素の酵素力は拡大の効率と関連している。通常PCRの拡大の急激な増加の期間ホット スタートのTaqの酵素の酵素力、より強く、より長く、より高い蛍光性信号の価値、多重PCRの検出のための適したの、より典型的『S字形の』カーブ。弱い酵素力のブランドのDNAポリメラーゼは2-plex反作用しか支えない一般にことができる。3-plex反作用をするとき、拡大のカーブは低い、蛍光性信号の価値は低く、典型的な拡大のカーブがない、従って結果は判断しにくい。

3. 高い感受性のホット スタートのTaqの酵素を選びなさい

一般的に、DNAポリメラーゼに高い拡大の効率および高い感受性があるが、また不一致がある。増幅されるべきターゲット遺伝子の多量のサンプルが低ければ、Taqの酵素の拡大の感受性をテストすることを推薦する。共通の検出方法はターゲット遺伝子のプラスミッドの片の十倍か5-fold勾配の希薄を遂行することより低い希薄でPCRの検出を遂行し、そしてより高い検出の感受性のホット スタートのTaqの酵素を選ぶ。

それは研究者が彼らの自身の実験条件および資金供給の条件に従って選ぶ必要がある上から見ることができる。ホット スタートのTaqの酵素の拡大の効率そして感受性を検出するために勾配の希薄の拡大の実験をすることが最善である。

ForegeneのTaqのDNAポリメラーゼの例:

Foreasy HS TaqのDNAポリメラーゼ

記述

Foreasy HS TaqのDNAポリメラーゼは遺伝子の組み変えの技術によって細菌を設計するエシェリヒア属大腸菌にDNAポリメラーゼ表現したである。酵素はプロダクトを非常に抵抗力があり、互換性があるようにする、結合され型板として検出の反作用のために直接サンプルlysate （Foregeneの換散システム）を使用できる独特な反作用のbufffferと。

適用

purifified型板および非purifified型板の質的なPCRそして量的なPCRの検出。

品質管理

1. 外因性のヌクレアーゼの活動は検出しなかった

ホストなしで残りのゲノムDNAを検出する2.PCR方法

3.Itはeffffectivelyヒト ゲノムの単一コピーの遺伝子を増幅できる

1週間室温の4.Store、noobvious活動の変更