Foregene Co.、株式会社。
中国FOREGENE、世界のFOREGENE!
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| 起源の場所: | 中国 |
| ブランド名: | FOREGENE |
| 証明: | ISO CE |
| モデル番号: | RT-02021 |
| 最小注文数量: | 1キット |
|---|---|
| 価格: | 224 usd per kit |
| パッケージの詳細: | 安全なTRANSのカートンが付いているパッキング |
| 受渡し時間: | 10仕事日 |
| 支払条件: | L/C、D/A、D/P、T/T、ウェスタン・ユニオン |
| 供給の能力: | 1ヶ月あたりの10000のキット |
| 名前: | RT-PCR EasyTM II （ツー ステップの） Cat.No.RT - 02021/02022のツー ステップRT-PCRのマスターの組合せ | 適用: | PCRの反作用のため |
|---|---|---|---|
| 梱包: | キットごとの100つのrxns | MOQ: | 1つのキット |
| 調達期間: | 10仕事日 | ブランド: | Foregene |
| OEM: | 受け入れられる | 支払い: | TT |
| 棚の時間: | 2年 | ||
| ハイライト: | ツー ステップRT PCRのマスターの組合せ,ツー ステップRT-PCR EasyTM II |
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Cat.No.RT - 02021/02022
ツー ステップRT-PCRのマスターの組合せ
RT-PCR EasyTM II （ツー ステップ）
Cat.No.RT - 02021/02022
ツー ステップRT-PCRのマスターの組合せ
研究の使用だけのため
-20℃の店
RT-PCR EasyTM IIは（ツー ステップ）同じキットでツー ステップRT-PCRのためのすべての試薬を含んでいて、RTの反作用およびPCRの反作用を結合し、最大限に活用されたRTの組合せおよびPCRの組合せを提供する。独特なRTの組合せは良質の最初の繊維のcDNAを容易そして効率的に総合できる。2× PCR EasyTMの組合せのプラスに高性能および特定の拡大がある。2の有機性組合せはターゲット遺伝子の検出をより敏感にする。
RNAの実時間定量分析はすぐにそして正確に遂行することができる。
キットは効果的に反作用の拡大の効率そして特定性を改善するために独特な反作用システムと結合される独特なForegeneの逆のトランスクリプション試薬およびForegene HotStar TaqのDNAポリメラーゼを使用する。
最大限に活用された反作用システムは反作用を持っているより高い検出の感受性、より強い熱安定性およびよりよい許容をする。
| RT-PCR EasyTM II （ツー ステップ） | ||
| キットの内容 | RT-02021 | RT-02022 |
| 100T （20μlシステム） | 500T （20μlシステム） | |
| 2× RT EasyTMの組合せ | 1ml | 1.7ml×3 |
| 2× PCR EasyTMの組合せのプラス | 1ml | 1.7ml×3 |
| 任意プライマー（50μM） | 200μl | 1ml |
| Oligo （dT） 18プライマー（50μM） | 200μl | 1ml |
| RNaseなしのddH2O | 1.7ml | 1.7ml |
| 使用説明書 | 1部分 | 1部分 |
1. 交通機関の状態
低温冷蔵庫の交通機関の全プロセス、キットが状態にのあることを確認するため <4>
2. 貯蔵条件
-20°C.で貯えられてレシートの直後の-20°Cで一定した温度冷却装置でプロダクトを貯えなさい。貯蔵条件が適切なら、プロダクトは1年の妥当性の期間の間に性能を低下させない。
2× RT EasyTMの組合せ:Foregeneの逆Transcriptase、RNaseの抑制剤、dNTPs、反作用の緩衝、オプティマイザおよび安定装置、等。
2× PCR EasyTMの組合せのプラス:Foregene TaqのDNAポリメラーゼ、dNTPs、Mg2+、反作用の緩衝、オプティマイザおよび安定装置。
注意:（キットを使用する前に注意を注意深く読みなさい）
試薬は繰り返された凍り、分解を避けるべきである他では試薬の性能は無効に減るか、またはなる。
型板のために、新しいサンプルから得られるか、または貯えられる-80℃でRNAを使用することを推薦する（RNAは繰り返された凍り、分解を避けるべきである）。
RNaseの汚染を避けるためには、実験操作はRNaseなしのスペースで遂行されるべきである;ピペットの先端および使用されるPCRの遠心分離機は管RNaseなしでなければならない;そして使い捨て可能な手袋およびマスクは身に着けられているべきである。
このキットは実験のために特定のプライマーによって使用されなければならない。遺伝子が実験の必要性に従って増幅されることができるように特定のプライマーを選びなさい。
使用の前に、氷の溶解、軽打および組合せのよりかなり前に使用に2×RT EasyTMの組合せおよび2×PCR EasyTMの組合せのプラスを完全に置きなさい;システムの準備は氷浴でキットの性能を改善し、PCRの拡大の特定性を改善するために作動するべきである。
注意:（キットを使用する前に注意を注意深く読みなさい）
- 試薬は繰り返された凍り、分解を避けるべきである他では試薬の性能は無効に減るか、またはなる。
- 型板のために、新しいサンプルから得られるか、または貯えられる-80℃でRNAを使用することを推薦する（RNAは繰り返された凍り、分解を避けるべきである）。
- RNaseの汚染を避けるためには、実験操作はRNaseなしのスペースで遂行されるべきである;ピペットの先端および使用されるPCRの遠心分離機は管RNaseなしでなければならない;そして使い捨て可能な手袋およびマスクは身に着けられているべきである。
- このキットは実験のために特定のプライマーによって使用されなければならない。遺伝子が実験の必要性に従って増幅されることができるように特定のプライマーを選びなさい。
- 使用の前に、氷の溶解、軽打および組合せのよりかなり前に使用に2×RT EasyTMの組合せおよび2×PCR EasyTMの組合せのプラスを完全に置きなさい;システムの準備は氷浴でキットの性能を改善し、PCRの拡大の特定性を改善するために作動するべきである。
RT-PCR EasyTM II （ツー ステップ）:（0.1pg-5μg合計のRNA）/20μlシステム
A-1:材料および試薬の準備
1. 準備されたRNAの型板（RNAを得、浄化するのにForegeneの合計のRNAの分離のキット シリーズ キットを使用することを推薦する）、特定のプライマー（10μM）および関連の消耗品および器械準備しなさい。
注:RNAの完全性を保障し、新しいサンプルから得られるRNAを使用するために試みなさい。
2. 自然に溶けるように後で使用できるようによく混合するためにそれがする氷浴の置かれた2×RT EasyTMの組合せそしてRNaseなしのddH2Oはおよび管の壁を打つ。
A-2:RTシステム準備
2× RT EasyTMの組合せは使用してが便利、速く汚染をすばらしい範囲に反作用システムの多数の準備によって引き起こされる操作および実験間違いの間に避ける。使用した場合、ちょうど反作用システムの容積半分の（反作用システムが20μl例えば、取得10μl 2×RT EasyTM組合せの解決）取りなさい、RNAの型板および逆のトランスクリプション プライマーを加え、20μlに容積の上で作るためにRNaseなしのddH2Oを加えなさい。特定のRTの反作用システム準備は1を次台に置くために参照できる。
形態1:RTシステム準備
| RT-PCRシステム付加 | 量 |
| 2× RT EasyTMの組合せ | 10μl |
| 任意プライマー（50μM） | 1μl |
| またはOligo （dT） 18プライマー（50μM） | 1μl |
| または特定のプライマー（2μM） | 1μl |
| 型板（RNA） |
Xμl （総RNA:<5> |
| RNaseFreeddH2O | （9-X） μl |
| 総容積 | 20μl |
A-3:RTの反作用プログラム配置
1. 上のテーブルについてのRTシステムを、組合せ穏やかに準備した後（穏やかに吹くのにピペットの先端を使用できる;またvortexerのそれを混合し、管の壁か管の帽子で分散する液体を集めるために遠心分離機にかけることができ使用可能に冷蔵庫にそれを置く）。
2. RTの反作用プログラム設定（反作用の温度、時間、等を置く表2）を参照しなさい。
注:システムがシステム準備の完了の直後に準備することができるように、組合せの活動を保障し、拡大の効率を改善するために、金属の浴室の後でRTの反作用システムを準備することが最善達する一定の反作用の温度（逆のトランスクリプション温度42℃か50℃）にである。反作用プログラムを入れなさい。RTの反作用はまたPCR機械で行うことができる。
形態2:RTの反作用プログラム配置
| ステップ | 温度 | 時間 | 内容 |
| 1 | 42℃か50℃ | 20分 | Renaturation& RT |
| 2 | 85℃ | 5min | 非活動化 |
注:任意プライマーを使用した場合、反作用は反作用の第一歩の前の10minのための25℃で予備加熱されるべきである。上記のプロシージャは参照だけのためである。実際の反作用の状態は型板、プライマー、等の構造条件によって変わる。複雑な二次結果を用いるRNAの型板のために、最初の反作用の温度は50℃であるために推薦される。
1. 反作用プロダクトはそれに続くテストで直接使用されるか、または-20°Cで1週まで間貯えることができる。長期保管のために、-80°C.で繰り返された凍り、分解を避けることを推薦する。
B:PCRの同一証明の反作用
B-1:PCRの反作用システム準備
cDNAを総合しステップAで型板として、提供される2×PCR EasyTMの組合せのプラスとキットで行うPCRの反作用を使用しなさい。自然に溶け、使用まで混合するために管の壁を打つようにそれがする氷浴の場所2×PCR EasyTMの組合せのプラス、cDNAおよびRNaseなしのddH2O。特定のPCRシステム準備のために、表3を次参照しなさい。
形態3:PCRの反作用システム準備の反应体系配制
| RT-PCRシステム付加 | 量 | 最終的な集中 |
| 2× PCR EasyTMの組合せのプラス | 10μl | 1× |
| 前方プライマー（10μM） | 0.5μl | 0.2-0.25μM 1* |
| 逆のプライマー（10μM） | 0.5μl | 0.2-0.25μM 1* |
| 型板（cDNA） | Xμl | 1-2μl |
| RNaseFreeddH2O | （9-X） μl | |
| 総容積 | 20μl |
1*:通常プライマーの最終的な集中はよりよい結果を得る0.2-0.25μMである。反作用の性能が粗末なとき、プライマー集中は0.1-0.5μMの範囲の内で調節することができる。
B-2:PCRの反作用の状態の設定
1. 上のテーブルについてのPCRシステムを、組合せ穏やかに準備した後（穏やかに吹くのにピペットの先端を使用できる;またvortexerのそれを混合し、管の壁か管の帽子で分散する液体を集めるために遠心分離機にかけることができ使用可能に冷蔵庫にそれを置く）。
2. PCRの反作用プログラム設定（反作用の温度そして時間を置く表4）を参照しなさい。
注:PCRの組合せの活動を保障し、拡大の効率を改善するために、PCRシステムを準備する前にPCR機械のPCRの条件を置くことが最善である。
形態4:PCRの反作用の状態の設定
| ステップ | 温度 | 時間 | 周期 | 内容 |
| 1 | 94℃ | 5min | 1 | Predenaturation |
| 2 | 94℃ | 10sec | 30-40 | 変性 |
| 3 | 55-65℃ | 20sec | アニーリング | |
| 4 | 72℃ | Xmin （2kb/min） 1* | 延長 | |
| 5 | 72℃ | 5min | 1 | 最終的な延長 |
1*:増幅されたターゲット片の長さに従って特定時を置きなさい。Foregene TaqのDNAポリメラーゼの拡大の速度は2kb/min.である。
注:PCRの反作用の状態は型板、プライマー、等の構造条件によって変わる。複雑な二次構造が付いているRNAの型板のために、逆のトランスクリプションの第一歩のための反作用の温度が50°C.であることが推薦される。特定の操作では、ターゲット片のサイズのような特定の条件に従って最適の反作用の条件を、焼きなましの温度を含んで、延長時間、等、増幅された片の基礎順序、およびプライマーのGCの内容および長さ設計することは必要である。
RT-PCR操作の図表
コンタクトパーソン: Maggie
電話番号: +8615281067355
