実験用試薬の最初繊維CDNA材料および装置の実験用試薬を発生させるための逆のトランスクリプション キットRT容易なII

最初の繊維のcDNAを発生させるための速く、感度が高い実験用試薬の逆のトランスクリプション キットRT容易なII

キットの塗布

遺伝子発現の実時間PCRの定量分析のために直接使用されて。

すぐにそして正確にRNAのウイルスのようなRNAの微量を分析できる。

高いGCの満足か複雑な二次構造が付いているRNAの型板の逆のトランスクリプション。

キットの構成情報

2×RTまたはEasyTM組合せ:Foregeneの逆Transcriptase、最大限に活用された比率のRNaseの抑制剤、dNTPs、安定装置、増強物、オプティマイザおよび逆のトランスクリプション プライマー（任意プライマー、Oligo （dT） ₁₈プライマー）。

RTの組合せの許容

2×RTまたはEasyTM組合せはアルコールおよびグアニジンの塩に分析をテストした後非常に高度耐性を示した。実験室で浄化されるRNAに頻繁に不十分な逆のトランスクリプション効果か低い逆のトランスクリプション効率に終って逆のトランスクリプションに対する強く抑制的な効果を、もたらすアルコールおよびグアニジンの塩の残余がある。Foregene RTアルコールおよびグアニジンの塩への容易なシリーズ プロダクトの許容は逆のトランスクリプションをより容易およびより有効にさせる。

アルコール許容の分析

グアニジンの塩の許容の分析

操作の前の準備

ユーザーがこのキットをことを使用する前に指示を注意深く読むことが強く推薦される。RT容易なシリーズ キットは、便利および速いです作動し易く、指示は全体のキットの正しい使用を提供する。使用の前に必要な実験材料および装置を準備しなさい。

型板のRNA量

型板のRNAは新しいサンプルからできれば得られるか、または-80°Cで貯えられるべきである（繰り返し、凍結をRNAの分解は避けるべきである）。

RT EasyTM II:（0.1pg-0.5μg合計のRNAまたは0.01pg-0.05μg mRNA）/10μlシステム。

無指定の拡大

1. 不合理なプライマー設計。

推薦:プライマー設計原理に従う設計プライマー。

2. ゲノムの残余。

推薦:逆のトランスクリプション キットをのような使用しなさい（猫。ゲノムの切除または設計TRANSイントロンのプライマーを含んでいるNO RH-01031）。

RT-QPCR拡大信号無し

1. RNAは低下する。

推薦:RNAの抽出のための材料はできるだけ新しい良質および高純度のRNAは使用されるべきである。

2. RNAは抑制剤を含んでいる。

推薦:逆のトランスクリプション抑制剤は一般にSDS、グアニジンの塩、エチレンジアミン四酢酸、等を含んでいる。抑制剤を取除くために70%のエタノールが付いているRNAの沈殿物を洗浄することを推薦する。

3. プライマー設計に関する問題。

推薦:プライマー設計原理に従って、点検のためのプライマーを設計し直しなさい。

ターゲット バンドは空白制御で現われる

1. 作動用具または試薬の汚染。

推薦:実験のためのすべての試薬か装置はオートクレーブに入れられるべきである。DNAのサンプルがピペットにでまたは遠心分離機管から引かれることを防ぐために注意深く、穏やかこぼれた。

2. 汚染はPCRの反作用システム準備の間に行われた。

推薦:扱った場合、例えば必要な注意を取りなさい:摩耗の乳液の手袋、使用フィルター先端。汚染防止システムで実時間PCRの組合せを使用しなさい。

3. プライマーは低下する。

推薦:プライマーが低下する使用し、蛍光性の検出の実験のための新しいプライマーによって取り替えなさいかどうか検出するのにSDS-PAGEの電気泳動を。